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DNA采血卡在臨床研究中,小動物(如小鼠、大鼠)可以從尾部采血。血樣可以直接滴到采血卡的圓圈內(nèi),以避免直接接觸到卡紙,尤其是在采樣前和血樣未干燥前。還應(yīng)避免凝血、分層以及過飽和等情況的發(fā)生。血樣應(yīng)均勻分布在圓圈內(nèi),采樣卡兩側(cè)血樣的顏色應(yīng)保持一致。如果樣品被污染,出現(xiàn)溶血現(xiàn)象或者采樣體積不夠,均為不合格測采樣。也可以使用加樣槍將血樣點到采血卡上,這樣可避免潛在的血細胞比容差異、采血量的影響、血樣在DNA采血卡上分布不均勻等采樣錯誤。加樣槍頭應(yīng)距離采樣卡若干毫米,當血樣碰觸到卡時會迅速分散開,使DNA采血卡上分布均勻。
另外,為保證分析的精密度和準確度,還應(yīng)該考察不同的點樣工具。點樣溫度、點樣體積的影響。
(1)點樣工具由于分析的化學(xué)性質(zhì)不同,分析物質(zhì)對不同介質(zhì)(塑料或者玻璃)的吸附程度不同,應(yīng)選擇不同的點樣工具,比如加樣槍或者內(nèi)壁浸泡乙二胺四乙酸(EDTA)或肝素鈉等抗凝劑的毛細管。
(2)點樣溫度為考察點樣溫度對準確度和精密度的影響,質(zhì)控全血在不同溫度下(室溫、37℃、0℃)放置30min后進行點樣,并隨行標準曲線測定質(zhì)控DBS樣品的濃度,考察點樣溫度對測試結(jié)果的影響。
(3)點樣體積為考察全血點樣體積對準確度和精密度的影響,選擇3種點樣體積進行點樣,并通過打孔得到相同大小的濾紙片,處理后進行樣品分析,隨行標準曲線測定其濃度??疾禳c樣體積對測試結(jié)果的影響。