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FTA采血卡與DNA采血卡直接提取法的研究與應(yīng)用
一種簡(jiǎn)約且易于自動(dòng)化操作的Whatman FTA采血卡血樣DNA提取方法。方法取直徑1.2mmFTA采血卡血樣,分別用FTA-DNA直接提取法及FTA常規(guī)提取方法提取DNA,AB-IdentifilerTM試劑盒分別進(jìn)行10μl和25μl體系檢測(cè)比較,并篩選批量FTA采血卡血樣DNA自動(dòng)化提取程序。結(jié)果200份FTA卡血樣分別采用2種方法提取DNA模板,25μl體系PCR-STR檢測(cè),分型結(jié)果均良好。10μl體系檢測(cè),FTA-DNA直接提取法優(yōu)于FTA常規(guī)提取方法,圖譜RFU值為1000~2000,采用自動(dòng)化工作站運(yùn)行該提取程序較手工操作DNA分型圖譜均衡性更佳;采用FTA常規(guī)提取方法檢測(cè),圖譜RFU值100~2000,小片段優(yōu)先擴(kuò)增現(xiàn)象明顯,且有19%的樣本出現(xiàn)丟峰現(xiàn)象,采用自動(dòng)化工作站運(yùn)行該程序?qū)ζ浣Y(jié)果改善不明顯。經(jīng)工作站運(yùn)行FTA-DNA直接提取法自動(dòng)程序及10μl體系檢測(cè)本2萬(wàn)余份FTA卡采集的血樣,均獲得16個(gè)STR基因座DNA分型結(jié)果。
本文建立的FTA-DNA直接提取法適用于FTA卡血樣自動(dòng)化DNA建庫(kù)。詳細(xì)介紹了一種簡(jiǎn)便、快速、安全的用于DNA制備的方法。方法:查閱了大量國(guó)內(nèi)外關(guān)于FTA卡及其應(yīng)用方面的文章。結(jié)果:詳細(xì)介紹了FTA卡在模板DNA制備以及在基因的儲(chǔ)藏、醫(yī)學(xué)檢測(cè)以及食源性致病菌的檢測(cè)方面的具體應(yīng)用。結(jié)論:FTA卡可作為一種通用、快速、簡(jiǎn)便的DNA模板制備方法可用于生物學(xué)各方面的研究。
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