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貝斯特塑料培養(yǎng)皿使用介紹

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貝斯特塑料培養(yǎng)皿使用介紹

發(fā)布日期:2019-06-17 作者: 點(diǎn)擊:


一、聚苯乙烯細(xì)胞培養(yǎng)皿(塑料培養(yǎng)皿)是生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室中最基本的工具。因此體外的玻璃形式由Petri于1887年引入。除疏水性塑料的幾何改性和親水轉(zhuǎn)化外,聚苯乙烯塑料培養(yǎng)皿在130年內(nèi)基本保持不變。今天,聚苯乙烯培養(yǎng)皿在藥理學(xué)和生物材料測(cè)試(細(xì)胞培養(yǎng),動(dòng)物模型,臨床試驗(yàn))的開(kāi)始,它用于詢(xún)問(wèn)細(xì)胞,但也用于人類(lèi)生命的開(kāi)始,即體外受精。以前的實(shí)驗(yàn)工作挑戰(zhàn)了聚苯乙烯培養(yǎng)皿的生物耐受性:Sommer等。表明當(dāng)與水性介質(zhì)接觸時(shí),聚苯乙烯變軟,促進(jìn)納米級(jí)堿性層的形成的效果與包埋的ROS一起對(duì)細(xì)胞具有不利影響。

二、在干燥之前,應(yīng)該沒(méi)有來(lái)自緩動(dòng)劑的內(nèi)臟的食物。在干燥前一天執(zhí)行這些步驟。

1.~2 mL泉水倒入新的35 mm塑料培養(yǎng)皿中。

2.將緩釋劑轉(zhuǎn)移到含有泉水的新菜中,將其從食物中分離出來(lái)。通過(guò)在室溫下將它們留在盤(pán)子中過(guò)夜來(lái)使心臟病死亡。

3.將含有~5 mL 10%甘油溶液(1份甘油,9份泉水)的玻璃表盤(pán)放入帶蓋的小塑料盒中。

4.將盒子在室溫下放置過(guò)夜(約16小時(shí))。

5.使用濕度計(jì)檢查腔室內(nèi)的濕度。約16小時(shí)后相對(duì)濕度應(yīng)> 90%。準(zhǔn)備瓊脂涂層培養(yǎng)皿蓋在使用當(dāng)天準(zhǔn)備瓊脂涂層的蓋子。不要存放或重復(fù)使用涂層蓋子。

6.用瓶裝泉水準(zhǔn)備2%瓊脂溶液,煮沸。

7.300μL沸騰瓊脂溶液移液到35mm培養(yǎng)皿的蓋子中。丟棄盤(pán)子本身; 只使用蓋子。

8.快速工作,使用移液器的尖端將瓊脂溶液均勻地分布在整個(gè)蓋子周?chē)?。盡量減少過(guò)量的瓊脂和不均勻的分布。

9.將蓋子側(cè)面傾斜,使多余的瓊脂匯集到一側(cè)。用移液管從蓋子側(cè)面取出并丟棄多余的瓊脂。

10.讓薄瓊脂涂層固化并干燥5-10分鐘。

11.使用微量移液管將步驟2中的饑餓的緩動(dòng)劑轉(zhuǎn)移到步驟10的瓊脂涂覆的皿蓋上。盡量減少隨著緩步移植的水量。

12.使用微量移液管從盤(pán)蓋上除去多余的水。

13.將含有緩動(dòng)劑的瓊脂涂層蓋子放入步驟5的加濕室中,并孵育過(guò)夜(約16小時(shí))。

14.從加濕室中取下蓋子,用解剖顯微鏡檢查干燥的樣品。標(biāo)本應(yīng)該采用圓形的墩狀外觀。

15.將緩動(dòng)劑保持在環(huán)境濕度(~40%相對(duì)濕度)下24小時(shí),然后在室溫下將其覆蓋在干燥器中。

16.2 mL瓶裝泉水移入培養(yǎng)皿蓋。

當(dāng)在解剖顯微鏡下觀察時(shí),已經(jīng)干燥儲(chǔ)存24小時(shí)的緩動(dòng)劑在10分鐘內(nèi)開(kāi)始退出其屯狀態(tài)。通常在30-60分鐘內(nèi)觀察到協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)。生存率通常為~80%,并通過(guò)對(duì)協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)和對(duì)刺激的反應(yīng)(用微量移液管尖端接觸)進(jìn)行評(píng)分來(lái)判斷。

 塑料培養(yǎng)皿


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