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采血卡廠家詮釋從異種血液中提取DNA
DNA是一條較大的聚合物鏈,與濾紙的孔徑大小相比較,從而限制了干血中DNA的釋放。傳統(tǒng)的促進(jìn)從采血卡片濾紙上釋放DNA的方法,要求使用強(qiáng)堿性化合物或加熱(10)將DNA轉(zhuǎn)化為高級DNA,從而損害了儲存DNA的物理和化學(xué)完整性,并使DNA易于分析,這就要求DNA以其天然的雙鏈形式被回收。在這里,我們采血卡廠家使用了一種簡單的技術(shù),它允許在濾紙上從干燥的血液中釋放出天然雙鏈形式的基因組DNA,同時進(jìn)行血液的普通處理。制造商的標(biāo)準(zhǔn)協(xié)議用于處理經(jīng)過處理的FTA紙。簡單地說,從一張卡采血卡片上取2 2 3mm,在1%的濃度范圍內(nèi),在標(biāo)準(zhǔn)1.5毫升管中,在400毫升溶液A,100微升溶液存在下,在1%的濃度范圍內(nèi)搖動1小時。
再用B溶液處理后,再通過旋轉(zhuǎn)籃分離出相應(yīng)的溶液相,然后直接加載到轉(zhuǎn)位柱上進(jìn)行DNA純化。將得到的DNA濃縮到5~10μl的半抗原膜上,然后轉(zhuǎn)移到0.6毫升的試管中儲存,直到用于610分析。由于在5 ul-10 ul范圍內(nèi)的最終體積很難在濾光片上標(biāo)準(zhǔn)化,我們觀察到最終的dna濃度。由于最終樣品體積的變異性,比總DNA產(chǎn)率變化更大。