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采血卡干血紙片法的采樣、萃取流程
1)在收集卡中填寫病人的姓名和采集日期等信息干血紙片法樣本采集卡樣式。由于戈謝病診斷需要檢測酶活力,故常采用具有蛋白保存功能的濾紙片進(jìn)行樣本采集,如Whatman 903濾紙片;
2)采血取樣??墒褂妹?xì)血管和靜脈血(可以使用EDTA或ACD抗凝劑,但應(yīng)避免使用肝素),注意不要使用含碘的消毒劑,在DBS卡的每個圈中滴一滴血,確保覆蓋整個圈切完全滲透該濾紙(血滴僅滴在濾紙的一面,不要在同一濾紙圓圈中重復(fù)滴上血液)。
3)為了保留酶的活性,首先必須在室溫下干燥4小時。干燥時保持濾紙懸空,水平固定在桌面邊緣,以保證充分干燥,注意使卡片遠(yuǎn)離直接的熱源或日光。為了避免交叉污染,一旦采集血樣后,勿將卡片重疊放置。在血斑完全干燥后,使用塑封帶將干燥收集卡進(jìn)行封裝,注意不要用手接觸血斑,以防樣本被污染。樣本一般為室溫保存及運(yùn)輸,如需長期儲存,需深低溫(-70度)保存 。
4)用打孔器在樣品區(qū)截取一個小圓片,加入溶劑進(jìn)行洗脫。在打孔器打孔過程中,要嚴(yán)格按照卡紙圓圈進(jìn)行打孔,防止在打孔過程中樣本間相互污染而影響檢測結(jié)果。洗脫獲得的樣本可用于后續(xù)的儀器檢測。
基于以上操作原理和方法,國內(nèi)外已經(jīng)開發(fā)了一批自動化的干血紙片法采樣系統(tǒng)。通過自動化設(shè)備可實現(xiàn)多樣本同時采集和萃取分析。