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采血卡廠家講述口腔細(xì)胞的采集及檢測(cè)
采血卡廠家山東成武貝斯特實(shí)驗(yàn)器材有限公司講述口腔細(xì)胞的采集及檢測(cè)：根據(jù)拭子類型，被擦拭的個(gè)體，擦拭技術(shù)以及在拭子中捕獲的細(xì)胞數(shù)量，從口腔拭子獲得的DNA的產(chǎn)量高度改變。 使用該方案的預(yù)期產(chǎn)量為60-85 ng /μl/拭子，相比之下至少高出兩倍。用傳統(tǒng)方法。 分離的DNA的產(chǎn)量和純度也取決于研究人員的處理程序。 當(dāng)材料沒(méi)有立即放入細(xì)胞裂解緩沖液中進(jìn)行進(jìn)一步處理時(shí)，觀察到DNA質(zhì)量和數(shù)量的降低。 在時(shí)間延遲處理的口腔拭子和中觀察到DNA條帶的降解，而未觀察到血液和毛發(fā)樣品中的降解，這可能是由于樣品的性質(zhì)和樣品中核酸酶濃度的變化。在消化之前。 盡管在低溫條件下儲(chǔ)存3天的樣品中存在一定程度的DNA降解，但本研究在樣品采集后立即從口腔細(xì)胞提取的DNA PCR擴(kuò)增產(chǎn)物或從口腔細(xì)胞中未顯示出任何顯著差異。在-20℃下冷凍3天。 此外，1周的儲(chǔ)存，如在4℃冷藏或在-20℃冷凍，也不影響提取的DNA的產(chǎn)量或DNA的PCR擴(kuò)增。
一般而言，對(duì)于DNA分型研究，新鮮全血或血液染色材料是個(gè)體DNA“指紋”的主要來(lái)源，并用作比較標(biāo)準(zhǔn)。 這里提出的研究結(jié)果使我們能夠證明使用口腔拭子和口腔細(xì)胞采集卡作為DNA提取的替代來(lái)源。 事實(shí)上，即使是嬰兒，也可以通過(guò)簡(jiǎn)單的分析輕松獲得口腔拭子，并進(jìn)行詳細(xì)分析。 我們還可以使用報(bào)告的PCR檢測(cè)從口腔拭子的DNA中擴(kuò)增病毒和細(xì)菌基因，以研究是否存在任何病原體。
來(lái)自所有樣品的分離的DNA產(chǎn)生了具有相似堿基對(duì)大小的靶線粒體基因的PCR產(chǎn)物。 然而，在限制性消化的情況下，頭發(fā)和血液PCR產(chǎn)物產(chǎn)生了優(yōu)異的消化產(chǎn)物。 這可能是PCR擴(kuò)增產(chǎn)物濃度高且PCR樣品中不含雜質(zhì)的結(jié)果，而不是限制酶未正確消化的口腔拭子樣品。 因此，我們可以使用頭發(fā)樣本代替血液樣本進(jìn)行基于PCR-RFLP的分子分析。
血清或血漿中分離的DNA中可能存在低水平的污染物，這些污染物的含量遠(yuǎn)低于口腔拭子標(biāo)本中存在的污染物。在這些技術(shù)中，污染物的數(shù)量較少，因此在PCR過(guò)程中污染物干擾的可能性非常低。采集口腔細(xì)胞樣本的人。 有報(bào)道稱，盡管儲(chǔ)存已經(jīng)降低了DNA的產(chǎn)量，但在長(zhǎng)期儲(chǔ)存樣品后PCR擴(kuò)增是成功的。 在本研究中，所有樣品中分離的DNA在-20°C冷凍保存，適合以后使用。
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